肝癌相关新基因BC047440反义真核表达载体构建及鉴定  

Construction and identification of antisense eukaryotic expression vector of novelgene BC047440 associated with hepatocellular carcinoma

作　　者：周建波[1] 李靖[1] 赵弘智[1] 郑璐[1] 梁平[1] 杨彤翰[1] 黄小兵[1] 

机构地区：[1]第三军医大学新桥医院肝胆外科,重庆400037

出　　处：《第三军医大学学报》2005年第15期1607-1609,共3页Journal of Third Military Medical University

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30170424)~~

摘　　要：目的构建肝癌相关新基因BC047440反义真核表达载体。方法提取人肝癌组织总RNA,逆转录酶-多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增BC047440基因cDNA序列,经与pMD18-T simp le载体连接,筛选、克隆、抽提质粒和双酶切后,将纯化的BC047440基因cDNA序列反向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,筛选、克隆、抽提质粒,从而构建BC047440基因反义真核表达载体pcDNA3.1(+)BC047440AS。结果经RT-PCR获得826 bp含限制性内切酶位点的cDNA片段,T载体克隆后经PCR扩增目的片段、测序,确定该片段为BC047440基因cDNA,进而构建反义真核表达载体pcDNA3.1(+)BC047440AS,并经PCR扩增目的片段,测序确证。结论成功构建了BC047440基因反义真核表达载体pcDNA3.1(+)BC047440AS,为进一步研究该基因功能奠定了基础。

关 键 词：肝癌 BC047440反义基因 真核表达载体 

分 类 号：R394-33[医药卫生—医学遗传学]