牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因与牛IL-2基因融合表达  

作　　者：李海涛[1] 苗利光[1] 刘艳环[1] 李庆超[1] 张广雷[1] 孙金霞[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109

出　　处：《畜牧与兽医》2010年第6期67-70,共4页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家科技支撑计划(2006BAD06B06)

摘　　要：本研究拟制备牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白。从患结核病鹿的肺组织中分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛淋巴细胞,经总RNA提取、RT-PCR得到了IL-2基因片段。经测序鉴定后,将4个目的片段重组,构建原核表达载体,并对表达的融合蛋白进行鉴定。克隆出了牛IL-2,以及牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;构建了原核表达载体pME290-SDCZ,并表达出了融合蛋白;Western印迹结果证实该重组蛋白能与抗牛分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应。制备了牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4融合蛋白,本研究为下一步研制重组牛结核亚单位疫苗奠定了基础。

关 键 词：牛分支杆菌 IL-2基因 融合蛋白 原核表达载体 MTB8.4 ESAT-6 AG85B 重组蛋白 RNA提取 亚单位疫苗 多克隆抗体 制备 特异免疫 目的片段 淋巴细胞 结合反应 测序鉴定 构建 PCR扩增 牛结核 

分 类 号：S8[农业科学—畜牧兽医]