张广雷

作品数：9被引量：32H指数：2
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发文主题：布氏杆菌表达载体构建基因重组基因克隆融合蛋白更多>>
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布氏杆菌L7/L12和OMP31基因克隆及融合表达被引量：2
《特产研究》2010年第4期4-8,共5页李海涛 苗利光 张广雷 刘艳环 孙金霞 王松 王文昊 
国家科技支撑计划(2006BAD06B06)
本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列,选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因,依此进行PCR扩增,利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组,构建了PME290-SDLOmp高效表达载体,并转化绿脓杆菌(PAK/2pfs),通过...
关键词：布氏杆菌 基因重组 表达载体构建 融合蛋白 
牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因与牛IL-2基因融合表达被引量：3
《畜牧与兽医》2010年第6期67-70,共4页李海涛 苗利光 刘艳环 李庆超 张广雷 孙金霞 
国家科技支撑计划(2006BAD06B06)
本研究拟制备牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白。从患结核病鹿的肺组织中分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛淋巴细胞,经总RNA提取、RT-PCR得到了IL-2基因片段。...
关键词：牛分支杆菌 IL-2基因 融合蛋白 原核表达载体 MTB8.4 ESAT-6 AG85B 重组蛋白 RNA提取 亚单位疫苗 多克隆抗体 制备 特异免疫 目的片段 淋巴细胞 结合反应 测序鉴定 构建 PCR扩增 牛结核 
中国牛病毒性腹泻病毒JZ05-1分离株全基因测序及分析被引量：21
《病毒学报》2010年第3期238-243,共6页李庆超 苗利光 李海涛 刘艳环 张广雷 肖佳美 
国家科技支撑计划项目;(2006BAD06B06)
牛病毒性腹泻病毒为瘟病毒属成员,呈世界性分布并在乳/肉牛业中造成严重经济损失。本研究利用MD-BK细胞增殖一株分离于我国吉林地区的牛源牛病毒性腹泻病毒JZ05-1毒株,观察发现其具有典型的致细胞病变效应。使用逆转录-聚合酶链式反应(R...
关键词：BVDV 全基因组 基因型 相似性 
牛病毒性腹泻病毒反转录及3'-末端克隆测序方法研究被引量：2
《特产研究》2010年第2期12-15,共4页李庆超 苗利光 李海涛 刘艳环 张广雷 庄风岐 
中国农科院特产研究基金项目
牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科瘟病毒属代表种,其基因组为单股正链RNA,无Poly(A)尾。传统的3'-末端快速扩增方法不适用于牛病毒性腹泻病毒的3'-末端克隆测序。本研究根据牛病毒性腹泻病毒基因组3'-末端共有特征碱基,设计回文锚定引物CGen...
关键词：牛病毒性腹泻病毒 瘟病毒 反转录 3'-末端 
重组抗菌肽LfcinB/LfampinB基因的克隆及表达载体的构建
《特产研究》2010年第2期16-18,39,共4页孙金霞 刘艳环 李海涛 李庆超 张广雷 苗利光 
中国农业科学院特产研究所基金项目
根据GeneBank中提供的牛乳铁蛋白基因序列,设计并合成了重组LfcinB/LfampinB基因,并通过PGEM-Teasy载体扩增。酶切回收的LfcinB/LfampinB片段与中间载体pP6连接。pP6上的启动子、信号肽和调控序列与LfcinB/LfampinB共同切下,获得具有上...
关键词：抗菌肽 克隆 表达载体 构建 
布鲁氏菌L7/L12、OMP31基因的克隆、测序及免疫原性分析被引量：4
《特产研究》2009年第4期5-8,共4页张广雷 苗利光 刘艳环 李海涛 李庆超 庄风歧 
国家科技支撑计划(2006BAD06B06)
为研制鹿布鲁氏菌病工程疫苗,根据已发表的布鲁氏菌核糖体蛋白L7/L12、外膜蛋白OMP31基因设计两对引物进行扩增,PCR产物连接pGEM-Teasy载体,转化DH5α后测序,并进行基因分析。结果从布鲁氏菌疫苗株中克隆出L7/L12和OMP312个目的基因,同...
关键词：布鲁氏菌 核糖体蛋白L7/L12 OMP31 同源性 
牛乳铁素研究进展被引量：2
《特产研究》2009年第4期71-73,79,共4页孙金霞 苗利光 刘艳环 李海涛 李庆超 张广雷 
国家科技支撑计划(2006BAD06B06)
牛乳铁素是由牛乳铁蛋白在酸性条件下经胃蛋白酶消化后产生的多肽,具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎症和免疫调节等多种生物学功能,可应用于多个方面。综述了牛乳铁素结构、功能、作用机制、制备及应用的研究进展。
关键词：牛乳铁素 牛乳铁蛋白 作用机制 功能 
重组牛分支杆菌ESAT-6基因的表达与鉴定
《特产研究》2009年第2期5-7,共3页李海涛 刘艳环 张广雷 李庆超 王志刚 刘慧洋 苗利光 
国家科技支撑计划(2006BAD06B06)
在前期工作的基础上,构建了pGEM-TE-ESAT6重组载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经诱导表达得到了20kD左右大小的重组蛋白,SDS-PAGE/Western Blot显示该重组蛋白是上清表达。为重组ESAT-6抗原的应用奠定了基础。
关键词：牛分支杆菌 ESAT-6基因 重组ESAT-6 
CFNCpG对BVDV1灭活抗原的免疫佐剂效应研究被引量：1
《特产研究》2008年第4期21-23,共3页刘艳环 王志刚 李海涛 李庆超 张广雷 苗利光 
中国农业科学院特产研究所科研基金项目(tcs-2006-01)
分别用CFNCpG、弗氏完全佐剂、氢氧化铝胶与BVDV1灭活抗原配制成疫苗免疫家兔,于免疫后每间隔7d检测中和抗体变化,来探讨CFNCpG对BVDV1灭活抗原的佐剂效应。试验结果表明,CFNCpG单独作为佐剂应用7d可使抗体滴度达到4.4(log_2SN_(50)),14...
关键词：BVDV1 CFNCpG 佐剂 
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