Fmoc固相直接法合成Aβ_(1-15)肽疫苗及其免疫活性  被引量:4

Directly Synthesize Aβ_(1-15) Peptide Vaccine by Fmoc Solid-phase Peptide Synthesis and Study Its Immune Activity

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作  者:杨学森[1,2] 汪华侨[1] 袁群芳[1] 谢瑶[1] 姚志彬[1] 叶小舟 吴继明 邹爱国 

机构地区:[1]中山大学基础医学院人体解剖学教研室 [2]中炬高新技术实业股份有限公司博士后工作站,广东中山528437 [3]中炬高新技术实业股份有限公司博士后工作站

出  处:《中山大学学报(医学科学版)》2006年第2期121-125,共5页Journal of Sun Yat-Sen University:Medical Sciences

基  金:国家自然科学基金资助项目(30400512);粤港关键领域重点突破项目(20054982210);广东省自然科学基金重大资助项目(20013137);广东省自然科学基金资助项目(04300218);广东省社会发展基金资助项目(2005B10401047);广州市科技计划基金资助项目(2004Z3-E0151;2005Z3-E4021);中山市科技局重点攻关基金资助项目(4209606);中国博士后科学基金资助项目(2004035603)

摘  要:【目的】探讨实验室合成Aβ1-15肽疫苗的方法,并对其进行鉴定。【方法】选取Aβ42主要包含B细胞抗原决定簇的片段Aβ1-15,采用8分支多重抗原肽系统,以Fmoc固相直接法合成MAPAβ1-15;用MAPAβ1-15疫苗免疫接种C57BL/6小鼠,ELISA检测血清特异性抗Aβ抗体。【结果】用Fmoc法直接合成方法成功制备MAPAβ1-15疫苗,质谱检测其主要离子峰的相对分子质量为15458,与理论相对分子质量15451十分接近,但还有其它不同分子质量的离子峰存在。以合成的MAPAβ1-15免疫C57BL/6小鼠后,可产生高滴度的特异性抗Aβ42抗体,第3次接种后抗体平均滴度为1:467±196,第5次免疫接种后,平均滴度为1∶4367±1120。对照组的血清抗体检测基本无明显变化。【结论】Fmoc固相直接法可成功合成出MAPAβ1-15,合成出的MAPAβ1-15具有很好免疫活性。[Objective] To explore how to synthesize the Aβ1-15 peptide vaccine and identify the quality and the immune activity of synthesized Aβ1-15 peptide vaccine. [Methods] To synthesize multiple antigenic peptide Aβ1-15 by Fmoc solid-phase pepfide directly synthesis. The molecular of synthesized MAP Aβ1-15 was analyzed by matrixassisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometric (MALDI-TOF MS). C57BL/6 mice were immunized with synthesized Aβ1-15 vaccine. The specific anti-Aβ-antibody in the serum of immunized mice was identified by ELLSA. [Results] The molecular weight of main component in synthesized MAP Aβ1-15 was 15 458, and it was quite near standard molecular weight of 15 451. Besides the main component, there were still others of different molecular weight. High titer of anti Aβantibody was induced in C57BL/6 mice after inoculated with MAP Aβ1-15 , the average titer was 1:467±196 and 1:4 367±1120 after third and frith time inoculated, respectively. [Conclusion] MAP Aβ1-15 could be synthesized successfully by Fmoc solid-phase peptide directly synthesis. The synthesized complex has significant immune activity.

关 键 词:Fmoc固相多肽直接合成 多重抗原肽 Aβ1-15疫苗 阿尔茨海默病 

分 类 号:R749.1[医药卫生—神经病学与精神病学]

 

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