人组织型纤溶酶原激活剂表达调控及高效表达的研究——Ⅱ.t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达  被引量:1

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作  者:欧阳应斌[1] 黄培堂[1] 徐秀英[1] 陈琳[1] 黄翠芬[1] 

机构地区:[1]军事医学科学院生物工程研究所,北京100850

出  处:《中国科学(C辑)》1996年第1期92-96,共5页Science in China(Series C)

摘  要:曾报道t-PA mRNA非翻译区序列对其表达有明显的抑制作用,在此基础上,通过对5′-UTR及3′-UTR的改造,使t-PA在COS-7细胞中的表达水平提高30倍左右。将t-PA表达质粒用电击法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-dhfr^-),经过混合加压及筛选,在CHO细胞中高效表达了t-PA,表达水平达到5000~6000IU/10~6细胞·d^(-1)。重组t-PA具有与天然t-PA相同的分子量及酶活性。经过8个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的,其主要指标均符合工程细胞株的要求。

关 键 词:组织型 纤溶酶原激活剂 研制 高效表达 基因工程 

分 类 号:TQ464.8[化学工程—制药化工] R394.8[医药卫生—医学遗传学]

 

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