SPLUNC1多肽抗体的设计、制备与鉴定  

Design,Preparation and Identification of SPLUNC1 Peptide Antibody

作　　者：周后德[1] 赵瑾[1] 张晋[1] 欧阳珏[1] 周鸣[1] 彭淑平[1] 李小玲[1] 李桂源[1] 

机构地区：[1]中南大学肿瘤研究所,长沙410078

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2006年第6期513-518,共6页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30300205)资助.~~

摘　　要：通过设计SPLUNC1蛋白的一段多肽,快速制备抗SPLUNC1的多肽抗体,检测多肽抗体的性能,为SPLUNC1的功能研究提供可靠的平台.用DS Gene1.1软件分析SPLUNC1蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其它因素,设计出两段15～20个氨基酸的多肽.将合成后的多肽与钥孔戚血蓝素（keyhole limpet hemocyanin,KLH）偶联,同时初筛出宿主血清与SPLUNC1无交叉反应的新西兰家兔,用与KLH相连的SPLUNC1多肽免疫家兔,2个月后获取血清,亲和纯化出抗SPLUNC1多肽抗体,通过ELISA法检测其效价,免疫印迹与免疫组化检测其特异性与适用范围.通过该方法得到了高效价与高特异性的SPLUNC1多克隆特异性抗体,ELISA法测定其效价可达到1：105,通过对包含有PLUNC家族不同成员的蛋白混合物进行Western印迹检测证明,该多肽抗体具有较高的特异性,不与同一家族中的其它蛋白发生交叉反应,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的分泌性蛋白SPLUNC1抗体具有高特异、高效价等特点,将为SPLUNC1基因的功能研究提供有用的研究材料.

关 键 词：SPLUNC1 多肽抗体 特异性 

分 类 号：R361[医药卫生—病理学]