阿霉素增强抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导HL-60细胞凋亡的作用  

Adriamycin enhances anti-human DR5 monoclonal antibody (mDRA-6) induced HL-60 cells apoptosis

作　　者：李淑莲[1] 马远方[1] 刘广超[1] 张军[1] 白慧玲[1] 刘英杰[1] 卢锋[1] 

机构地区：[1]河南大学细胞与分子免疫学实验室,开封475001

出　　处：《中华血液学杂志》2006年第7期461-464,共4页Chinese Journal of Hematology

基　　金：河南省杰出人才创新基金(0321001800);河南省医学科技创新人才基金(2002-119)

摘　　要：目的观察抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体(单抗)mDRA-6与阿霉素(Adr)对 HL-60细胞的协同杀伤作用。方法用 DR5蛋白免疫 BALB/c 小鼠,融合筛选抗 DR5杂交瘤细胞,制备抗人DR5单抗 mDRA-6;流式细胞术测定 Adr 对 HL-60细胞表面 DR5表达的影响;荧光显微镜下观察mDRA-6与 Adr 协同作用下 HL-60细胞的形态变化;MTT 法测定1μg/ml Adr 与不同浓度的 mDRA-6对 HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测 mDRA-6与 Adr 联合对 HL-60细胞 DNA 片断化的影响结果 Adr 诱导 HL-60细胞表面 DR5表达,mDRA-6作用后 HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成,mDRA-6与 Adr 联用细胞形态变化更明显;mDRA-6与 Adr 对 HL-60细胞具有明显的协同杀伤作用,20 ng/ml 的 mDRA-6作用 HL-60细胞10h,细胞死亡率为9.32%,1μg/ml Adr作用 HL-60细胞10 h,细胞死亡率为17.47%,20 ng/ml mDRA-6联合1μg/ml Adr,可使 HL-60细胞死亡率增至65.06%;20 μg/ml mDRA-6与1μg/ml Adr 联合作用于 HL-60细胞3 h,DNA 琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯形”条带。结论抗 DR5单抗 mDRA-6与 Adr 对 HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用。Objective To investigate synergistic killing effect of anti-human DR5 （ death receptor 5 of TRAIL） monoclonal antibody （mDRA-6） and adriamycin（Adr） on HL-60 cells. Methods mDRA-6 was prepared by immunizing BALB/c mice with DR.5 protein. DR5 expression on Adr-treated HL-60 cells was detected by flow cytometry. Morphologic changes of HL-60 cells were observed under fluorencence microscope. Cytotoxic and apoptotic effects of mDRA-6 and Adr on HL-60 cells were measured by MTT analysis. DNA fragmentation was detected by agarose gel electrophoresis. Results Adr induce DR5 expression on HL-60 cells. Cell budding, chromatin condensation and apoptotic body formation were observed in HL-60 cells treated by mDRA-6 and Adr. Death and apoptosis of these cells and DNA ladder were exhibited on agarose gel electrophoresis. Conclusion mDRA-6 and Adr have synergistic killing effect on HL-60 cells.

关 键 词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 死亡受体 抗体 MDRA-6 阿霉素 

分 类 号：R73-3[医药卫生—肿瘤]