HIV-1C亚型调控蛋白Nef在大肠杆菌中的表达  

Expression of Regulatory Protein Nef of HIV-1 Subtype C in E.coli

作　　者：戴青[1] 孙明[1] 周东霞[1] 蒋国润[1] 黄小琴[1] 褚嘉祐[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院,中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,昆明650118

出　　处：《中国生物制品学杂志》2006年第4期347-348,共2页Chinese Journal of Biologicals

基　　金：国家863基金资助项目(2005AA218030).

摘　　要：目的表达人免疫缺陷病毒1型C亚型调控蛋白Nef,为研制HIV疫苗寻找新的途径。方法通过PCR扩增,获得HIV-1C亚型Nef基因片段,并将其克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,以SDS-PAGE和Westernblot分析表达产物。结果表达产物是相对分子质量为50000的GST融合蛋白,且能与p27单克隆抗体发生特异性反应。结论重组Nef蛋白在大肠杆菌中得到了有效表达。Objective To express the regulatory protein Nef of HIV-1 subtype C in E. coli. Methods Amplify the Nef gene fragment of HIV-1 subtype C by PCR and clone into prokaryotic expression vector pGEX-5X-1, then transform to E. coli BL21 （ DE3 ） for expression under induction of IPTG. Identify the expressed product by SDS-PAGE and Western blot. Results The GST fusion protein with a relative molecular weight of 50 000 was expressed and showed specific reaction with McAb against p27. Conclusion Recombi- nant Nef protein was successfully expressed in E. coli.

关 键 词：人免疫缺陷病毒Ⅰ型 NEF蛋白 原核表达 

分 类 号：R512.910.1[医药卫生—内科学] R373.9[医药卫生—临床医学]