利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒  

作　　者：刘光清[1] 倪征[1] 云涛[1] 张玉颖[1] 杜青云[1] 盛祖恬[1] 梁华丽[1] 华炯刚[1] 李双茂[1] 陈剑平[1] 

机构地区：[1]浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所农业部病毒学与生物技术重点实验室,杭州310021

出　　处：《科学通报》2006年第13期1541-1544,共4页Chinese Science Bulletin

基　　金：浙江省自然科学基金资助项目（批准号：Y305047）.

摘　　要：在前期构建的兔出血症病毒(rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变.大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电子显微镜下可观察到RHD病毒粒子.结果表明,利用反向遗传学技术获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.

关 键 词：兔出血症病毒 反向遗传学 全长CDNA RK13细胞 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]