硫矿硫化叶菌MTSase和MTHase基因的克隆与表达  

Cloning and Expression of MTSase and MTHase from Sulfolobus solfataricus in E.coli

作　　者：陈晓斌[1] 林建平[1] 金志华[1] 岑沛霖[1] 

机构地区：[1]浙江大学生物工程研究所,杭州310027

出　　处：《微生物学通报》2006年第5期54-58,共5页Microbiology China

摘　　要：从嗜热硫矿硫化叶菌(Sulfolobussolfataricus)ATCC35092的基因组中用PCR方法扩增得到编码MTSase和MTSase的基因,分别将其插入原核表达载体pTrc99a中,并转入大肠杆菌BL21(DE3),进行诱导表达。MTSase和MTHase酶活产率达到了31·3U/g(wetcell)和403U/g(wetcell)。在75℃,pH5·0条件下,两酶联合作用转化淀粉生产海藻糖,当淀粉浓度为15%,DE值为10时,海藻糖转化率最高为53·6%。The genes of maltooligosyl trehalose synthase （MTSase） and maltooligosyl trehalose tetrahydmlase （MTHase） from Sulfolobus solfataricus ATCC 35092 were amplified using PCR. The expression plasmids, pTrc99a-MTSase and pTrc99a-MTHase, were constructed by inserting these two DNA fragments into E. coli expression vector pTrc99a. The specific activity of MTSase and MTHase in E. coli BL21 （ DE3 ） at optimal fermentation conditions reached 31.3U/g （wet cell） and 403U/g （wet cell）, respectively. The biotransformation of partially hydmlyzed starch to trehalose catalyzed by MTSase and MTHase was carried out at 75℃ and pH 5.0. The highest yield of trehalose （ca. 53.6% ） was gained when the original starch concentration was 15% （w/v） and the DE value was 10.

关 键 词：麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase) 麦芽寡糖基海藻糖海藻糖水解酶(MTHase) 海藻糖 淀粉 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]