丙型肝炎病毒非结构蛋白3全长基因的克隆和表达  

Cloning and expression of full-length hepatitis C NS3 gene in Escherichia coli

作　　者：安润[1] 楚雍烈[1] 杨娥[1] 寻萌[1] 孙菊[1] 卢阳[1] 郑建武[1] 

机构地区：[1]西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,陕西西安710061

出　　处：《西安交通大学学报（医学版）》2006年第5期449-451,473,共4页Journal of Xi’an Jiaotong University（Medical Sciences）

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30470089);国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2002AA21416)

摘　　要：目的克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因NS3,为进一步研究其基因功能奠定基础。方法设计特异性引物,以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得全长NS3基因。将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,经酶切、PCR及测序鉴定后,与表达载体pET32a重组,后转入BL21菌株并诱导表达。采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS3基因的蛋白表达水平。结果含有NS3的重组体构建成功并在大肠杆菌中表达。结论运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了HCV非结构基因NS3蛋白,为尽一步研究HCVNS3基因功能奠定了基础。Objective To clone the full-length NS3 gene of hepatitis C virus （HCV） and express it in E. coli. Methods HCV NS3 gene was amplified with PCR and inserted into the pMD18-T vector. The cloned HCV NS3 gene was subcloned into expression vector pET32a, and expressed in E. coli BL21. The expressed gene product was identified with SDS-PAGE and Western-blot methods. Results The full-length HCV NS3 gene could be cloned and expressed in E. coli successfully. Conclusion HCV NS3 gene was cloned and expressed, which may be helpful for further studies on characterizations of HCV NS3 gene.

关 键 词：丙型肝炎病毒 非结构蛋白3基因 基因表达 克隆 

分 类 号：R373.2[医药卫生—病原生物学]