鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究  

作　　者：张建峰 候加法 张皎 

出　　处：《中国家禽》2006年第20期53-53,共1页China Poultry

基　　金：国家自然科学基金（30270998）;江苏省自然科学基金（Q200443）资助

摘　　要：应用RT—PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子I基因cDNA进行扩增，然后将特异性片段连接到pMD18-T载体，测序结果表明，与已知序列同源性为100％。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达，经Tricine—SDS—PAGE分析，原核表达产物为7．6ku的重组蛋白，占菌体总蛋白的23％，Western印迹表明重组蛋白具有IGF—Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在，经7moL／L盐酸胍的变性液溶解及0．5moL／L精氨酸复性液处理，表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应，结果表明重组鸡IGF—Ⅰ具有较高的生物学活性。

关 键 词：类胰岛素生长因子 生物学活性 表达产物 中鸡 WESTERN印迹 克隆 基因CDNA 重组蛋白 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]