小鼠TIM2基因真核表达载体的构建及鉴定  

作　　者：马玲娣[1] 张彦[2] 文世宏[1] 何於娟[3] 刘小珊[4] 康格非[3] 蒋纪恺[4] 

机构地区：[1]南京医科大学附属常州第二人民医院中心实验室 [2]重庆医科大学检验系临床生化教研室,重庆400016 [3]重庆医科大学检验系临床生化教研室 [4]汕头大学医学院分子生物学中心

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2006年第6期713-715,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30171150)

摘　　要：目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H22细胞中TIM2mRNA的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,用脂质体法转染H22细胞后,用荧光显微镜观察和RT-PCR法检测,可见细胞内有EGFP及TIM2mRNA的表达。结论:成功地构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠H22细胞中表达,为进一步研究TIM2在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。

关 键 词：T细胞免疫球蛋白和黏蚩白结构域分子2 增强型绿色荧光蛋白 真核表达载体 小鼠H22肝癌细胞 

分 类 号：R394[医药卫生—医学遗传学]