应用荧光高效液相法检测心肌磷脂酶D的活性  

A HPLC-fluorescence detection method for determination of myocardial phospholipase D activity

作　　者：朱莹[1] 蒋珍妮[1] 王建安[1] T.Kurz 

机构地区：[1]浙江大学医学院附属第二医院心内科,浙江杭州310009 [2]德国吕贝克大学临床二所,德国吕贝克23538

出　　处：《中国病理生理杂志》2007年第1期201-202,205,共3页Chinese Journal of Pathophysiology

基　　金：国家教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(No.教外司留(2004)527号)

摘　　要：目的:为心肌磷脂酶D活性的检测提供新的可靠、灵敏的实验方法。方法:提取心肌膜脂质,以荧光标记的磷脂酰胆碱及乙醇为底物。高效液相色谱条件:LiChrosphere100色谱柱(250mm×4mm,5μm)为固定相,流动相A液为正已烷-丙醇-冰醋酸(82∶17∶1,V∶V∶V),流动相B液为丙醇-水-冰醋酸(85∶14∶1,V∶V∶V),柱温45℃,流速1mL/min,梯度洗脱。荧光检测:激发波长475nm,发射波长515nm。结果:PLD标准品在0.625-40pmol范围含量与峰面积呈线性关系,相关系数0.999;孵育时间在0-45min,磷脂酰乙醇生成量与孵育时间呈直线相关;日内及日间变异系数分别为5.6%、6.9%。小鼠心肌样品色谱图见二酯酰甘油、磷脂酰乙醇、磷脂酸3个峰,心肌磷脂酶D活性检测水平为nmol.h-1.g-1。结论:荧光高效液相法是检测心肌磷脂酶D活性的简便、快速、准确、灵敏的实验方法。

关 键 词：色谱法 高压液相 心肌 磷脂酶D 小鼠 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]