人干细胞因子cDNA克隆及其在大肠杆菌中的高效表达  被引量:3

cDNA Cloning of Human Stem Cell Factor and Its High Level Expression in E. coli

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作  者:陈卫东[1] 狄旭[1] 李江[1] 宋飞 陈松森[1] 梁植权[1] 

机构地区:[1]中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所,北京100005

出  处:《中国医学科学院学报》1997年第1期29-34,共6页Acta Academiae Medicinae Sinicae

基  金:中国医学科学院基金

摘  要:以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子(SCF)全长CDNA(约0.8kb)。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA(约0.5kb)结构正确,构建了含有该基因的表达质粒(PBV-mhSCF)并在大肠杆菌中获得高效表达。The total RNA of HepG2 cell was extracted as the template by ultrocentrifuge method The full length cDNA (0. 8 kb) encoding the human stem cell factor (hSCF) was amplifie by RT-PCR method. The cDNA encoding mature hSCF (0.5 kb) was sequenced and was recombined into the expression vector (PBV-220). The expression level of rhSCF in E. coli DH5a was about 15% of the total protein.

关 键 词:人干细胞因子 CDNA 聚合酶链反应 基因重组 表达 

分 类 号:R394.8[医药卫生—医学遗传学] Q784[医药卫生—基础医学]

 

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