节杆菌PJ3基因组中发现2,3-二羟基联苯双加氧酶基因  

作　　者：杨美英[1] 麻鹏达[1] 李文明[1] 刘晶莹[1] 李亮[1] 朱筱娟[1] 王兴智[1] 

机构地区：[1]东北师范大学遗传与细胞研究所

出　　处：《科学通报》2007年第7期785-790,共6页Chinese Science Bulletin

基　　金：中国-瑞典国际合作项目(批准号:AM15B12);长江学者和高校创新团队(批准号:IRT0519);高等学校学科创新引智计划(批准号:B07017);国家植物转基因中试与产业化基地(吉林)(批准号:JY03-B-17);长春市科技局国际合作项目资助

摘　　要：从污水中分离出一株以咔唑为惟一碳源和氮源生长的菌株PJ3,用16S rDNA鉴定为节杆菌(Arthrobacter sp),构建了PJ3菌株基因组文库并获得一株阳性克隆JM109(pUCW402).通过GenSCAN软件和BLAST分析发现,在插入pUCW402的外源片段(3360bp)中存在一个由933bp片段编码的2,3-二羟基联苯双加氧酶基因.进化分析表明,从PJ3来源的2,3-二羟基联苯双加氧酶在进化树上形成一个独立的分支.Southern杂交进一步证实,编码该酶的基因定位于节杆菌PJ3的基因组DNA上.为了鉴定该基因的生物学功能,构建了BL21(pETW-8)重组菌株.与菌株JM109(pUCW402)和PJ3相比,2,3-二羟基联苯双加氧酶的表达水平在BL21(pETW-8)中最高.酶活分析表明,2,3-二羟基联苯双加氧酶不具有绝对专一性,对2,3-二羟基联苯的催化能力高于邻苯二酚.因此推测PJ3菌株对芳香族化合物降解过程中,2,3-二羟基联苯双加氧酶主要负责催化双环化合物的降解.

关 键 词：2 3.二羟基联苯双加氧酶基因 节杆菌(Arthrobacter sp)进化树 基因定位 酶活力 

分 类 号：Q933[生物学—微生物学]