胃癌抗原相关基因MPS-1的融合表达及兔抗GST-MPS-1抗体的制备  

作　　者：王运伟[1] 朱正纲[1] 顾琴龙[1] 

机构地区：[1]上海交通大学医学院瑞金医院外科上海消化外科研究所,上海200025

出　　处：《上海交通大学学报（医学版）》2007年第5期609-609,共1页Journal of Shanghai Jiao tong University:Medical Science

基　　金：国家高技术研究发展计划("八六三"计划)(2002BA711A06);上海市自然科学基金(03ZR14041)

摘　　要：目的在大肠杆菌中表达GST-MPS-1融合蛋白并制备兔抗GST-MPS-1抗体。方法将MPS-1全长cDNA克隆笔pGEX-5X载体内,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导GST-MPS-1融合蛋白的表达。以分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备抗GST-MPS-1抗体。用Western blotting和细胞免疫荧光染色法,检测兔抗GST-MPS-1抗体的特异性。结果经测序和酶切鉴定确认,MPS-1基因以正确的方式插入到载体中。此重组表达载体经IPTG诱导后,可高效表达相对分子质量(Mr)为36000的GST-MPS-1融合蛋白。以融合蛋白免疫兔获得的抗血清,经ELISA检测效价达到1×105。Western blotting和细胞免疫荧光染色证实,该多克隆抗体能与MPS-1蛋白特异性结合。结论兔抗MPS-1特异性抗体的获得,为进一步检测MPS-1蛋白的表达和功能分析奠定了基础。

关 键 词：胃癌 肿瘤相关抗原 MPS-1 融合蛋白 多克隆抗体 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤]