猪瘟兔化弱毒囊膜糖蛋白EI基因的扩增与克隆  

Amplification and Cloning of Envelope Glycoprotein E1 Gene of Lapinized Hog Cholera Virus

作　　者：金扩世[1] 李红卫[1] 章金刚[1] 王新平 涂长春[1] 殷震[1] 

机构地区：[1]解放军农牧大学军事兽医研究所

出　　处：《中国畜禽传染病》1997年第2期10-12,共3页

基　　金：国家"863"计划资助项目;国家自然科学基金

摘　　要：本试验直接从细胞培养液中提取猪瘟兔化弱毒（ＨＣＬＶ）ＲＮＡ，并根据猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株和Ｂｒｅｓｃｉａ株的核苷酸序列，将ＥＩ基因分两段，设计并合成了４条引物。采用反转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），成功地扩增出了ＨＣＬＶ保护性囊膜糖蛋白ＥＩ基因。以ｐＧＥＭ－Ｔ和ｐＵＣ１９为载体，将ＥＩ基因的两个片段分别进行克隆并转化到大肠杆菌ＪＭ１０１。经过分析鉴定。Based on the sequences of hog cholera virus (HCV) strains Brescia and Alfort,two sets of degenerate primers were designed,chemcially synthesized and used to amplify 5′ terminal half and 3′ terminal half of E1 gene of Lapinizde Chinese Strain of Hog Cholera Virus(HCLV) by reverse transcription polymerase chain reaction (RT PCR) from total RNA extracted from calf testis cell culture.The two cDNA fragments were cloned in pGEM T or pUC19.

关 键 词：猪瘟 兔化弱毒疫苗 免疫 

分 类 号：S858.285.3[农业科学—临床兽医学] S852.4[农业科学—兽医学]