Probasin启动子的克隆及其在不同肿瘤细胞系中的表达活性  

Cloning of Probasin promoters and their expression in different tumor cell lines

作　　者：张翔[1] 郝晓柯[1] 刘家云[1] 苏明权[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院检验科,西安710032

出　　处：《中国肿瘤生物治疗杂志》2007年第3期287-290,共4页Chinese Journal of Cancer Biotherapy

摘　　要：目的:构建Probasin(PB)启动子调控的pGL3表达载体,比较两种不同组成形式的Probasin启动子的组织特异性和活性。方法:提取大鼠前列腺组织DNA,通过PCR得到Probasin启动子(-426,+28bp)序列,并通过交叠PCR得到改造的ARR2PB序列,分别插入pGL3-Basic表达载体,同时构建CMV启动的荧光素酶载体P3.1-LUC作为阳性对照,并用pEGFP-N2载体做转染效率对照,用脂质体法把构建好的PB-pGL3载体、ARR2PB-pGL3以及P3.1-LUC分别转染人前列腺癌细胞LN-Cap、PC-3,以及HeLa宫颈癌细胞和张氏肝细胞等4种不同的细胞系,用荧光显微镜检测荧光素酶的表达量。结果:经酶切鉴定及测序后证实所构建的载体正确。观察各个细胞系中转染pEGFP-N2后都有绿色荧光的表达;荧光素酶在前列腺癌细胞系中的表达量高于其他组织来源的细胞系,而且其中激素依赖性的LNCap细胞中的荧光素酶表达量明显高于非激素依赖性细胞PC3;ARR2PB-pGL3载体的荧光素酶表达量明显高于PB-pGL3载体。结论:由Probasin启动子调控的pGL3表达载体具有前列腺组织特异性,两种不同组成形式的Probasin启动子中以ARR2PB的启动活性为佳。

关 键 词：前列腺癌 启动子 基因治疗 Probasin基因 

分 类 号：R730.23[医药卫生—肿瘤]