结核分支杆菌LprG基因的克隆、表达及纯化  

作　　者：张欣[1] 张荣波[1] 赵金存[2] 

机构地区：[1]安徽理工大学医学院病原生物学教研室,安徽淮南232001 [2]北京大学医学部免疫系,北京100083

出　　处：《广东医学》2007年第9期1420-1421,共2页Guangdong Medical Journal

摘　　要：目的在大肠杆菌中重组表达MTB LprG基因,纯化回收,为进一步研究其在结核病诊断中的价值奠定基础。方法从MTB H37Rv基因组中PCR扩增出MTB LprG基因,克隆到pEASYT1载体中,经序列测定后,再亚克隆到表达载体pET28a(+)中,转化入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,Western-blot分析鉴定,采用Ni-NTA柱纯化LprG蛋白。结果扩增产物序列无突变,重组表达载体pET28a(+)-LprG酶切鉴定正确,LprG蛋白在E.coliBL21(DE3)中的表达量约占菌体总蛋白的38%左右,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析在27kDa处见到目的蛋白条带,经Ni-NTA柱纯化后,得到纯度较高的该蛋白。结论构建了LprG基因的重组表达载体,获得了纯化的蛋白,为以后研究奠定了基础。

关 键 词：结核分支杆菌(MTB) LprG基因 克隆 表达 纯化 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学]