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作 者:张华文[1] 杨延兵[1] 秦岭[1] 管延安[1] 段乃彬[1] 倪大鹏[2] 于东安[3]
机构地区:[1]山东省农业科学院作物研究所,山东济南250100 [2]山东省农业科学院原子能农业应用研究所,山东济南250100 [3]安徽大学生命科学院
出 处:《山东农业科学》2007年第5期34-37,共4页Shandong Agricultural Sciences
基 金:农业结构调整重大技术研究专项"高效优质谷子新品种选育及配套栽培技术研究"(05-05-01B);山东省农业科学院青年基金项目"利用DNA指纹和蛋白质图谱进行谷子品种真实性鉴定的研究"(2005YQ051)资助
摘 要:以10个谷子品种为材料,利用A-PAGE的方法,探索了谷子盐溶蛋白分离的适宜实验条件。通过改变H2O2用量、胶浓度、交联度、电极液pH值、进样量及有无浓缩胶等因素,获得了不同盐溶蛋白酸性电泳图谱,经综合分析,提出了分离谷子盐溶蛋白的适宜A-PAGE电泳体系。具体指标为:1 ml胶液中用1μl 3%H2O2,胶浓度13%,交联度4.0%,电极液pH值3.7,进样量控制在20-30μl之间。在有浓缩胶的条件下,盐溶蛋白分离效果好,电泳图谱清晰,分辨率高。The experiment was conducted to optimize the conditions of A-PAGE for isolating salt soluble proteins of foxtail millet. 10 foxtail millet varieties were used for A-PAGE. A number of A- PAGE electropherograms were obtained at different levels of dosage of catalyst, gel concentrations, cross-linkages, injecting volumes, pH of gel buffer, and the use of inspissate gel. The optimal conditions for A-PAGE were raised after deliberate investigation. Detailed criteria were as following: dosage of 3% H2O2 1 μl/ml gel, gel concentration 13%, cross-linkages 4%, pH of gel buffer 3. 7, and the injecting volumes between 20 and 30μl. Furthermore, the use of inspissate gel enhanced the resolution of gel electropherograms.
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