利用TIRFM技术检测PC12细胞中类突触小囊泡的锚定和融合特性  

作　　者：周围[1] 朱丹[1] 梁滔 李臣鸿[1] 吴政星[1] 

机构地区：[1]华中科技大学教育部分子生物物理重点试验室华中科技大学生命科学与技术学院,武汉430074

出　　处：《科学通报》2007年第19期2276-2282,共7页Chinese Science Bulletin

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30670502;30470646);国家重点基础研究发展计划(批准号:2006CB503908)资助项目

摘　　要：受到广泛关注的神经递质的释放是通过突触囊泡与突触前膜的融合完成的.通过对单个囊泡动力学的分析发现,在突触囊泡分泌过程中除了"完全融合"(full fusion)模式外,还存在着"部分融合即离开"(kiss and run)和"部分融合且停留"(kiss and stay)两种融合模式.在神经元受到强烈刺激时,这两种分泌模式尤为重要.同时突触囊泡融合前的转运、锚定、激活过程在神经递质的释放和调节过程中起着很关键的作用.在高K+刺激下的PC12细胞中,我们运用全内反射荧光显微镜(total internal reflection fluorescence microscopy,TIRFM)技术,通过VAMP2-pHluorin和VAChT-TDimer2双色荧光成像的方法跟踪类突触小囊泡(synaptic vesicle-like microvesicles,SLMVs)的锚定和融合过程.结果表明,在高K+刺激的PC12细胞中,部分融合即离开这种分泌模式占主导地位,同时发现在高K+刺激下SLMVs在细胞膜上的停留时间增加了,说明被激活囊泡的囊泡数量增加.

关 键 词：囊泡乙酰胆碱转运体 类突触小囊泡 VAMP2 胞吐 锚定 

分 类 号：Q42[生物学—神经生物学]