嗜碱性芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达  

Expression of the Gene Encoding Alkaline Protease PB92 from Bacillus alcalophillus 1in E.coli and Bacillus

作　　者：孙同毅[1] 陈坤[1] 郝继兴[1] 路福平[1] 杜连祥[1] 

机构地区：[1]天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院,天津300457

出　　处：《生物技术通报》2007年第5期120-123,127,共5页Biotechnology Bulletin

摘　　要：从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,Mapr分别插入到大肠杆菌载体pET-22b(+)和枯草芽孢杆菌载体pWB980中构建成重组分泌型表达载体pET22b(+)-Mapr、pWB980-Mapr。碱性蛋白酶基因分别在大肠杆菌宿主BL21和枯草芽孢杆菌DB104中得到表达。SDS-PAGE分析,重组蛋白酶的分子量为28kD。在大肠杆菌,所得酶活为231U/ml,而在枯草芽孢杆菌,其酶活为1563U/ml。大概是由于碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌折叠成熟机制与大肠杆菌的不同造成的。The sequence of serine protease gene Mapr cloned from B.alkalophilic PB92 chromosomal DNA was inserted into E.coli vector pET-22b（＋）and B.subtilis vector pWB980 to yield the recombinant secrete plasmid pET22b（＋）-Mapr,pWB980-Mapr,respectively.The protease was expressed in the host E.coli BL21 and B.subtilis DB104,respectively.SDS-PAGE analysed,the molecular weight of Mapr was 28 kD.The caseinolytic activity was 231U/ml in E.coli BL21 and 1 563U/ml in B.subtilis DB104.It may be caused by the different maturation mechanism between B.subtilis and E.coli.

关 键 词：嗜碱芽孢杆菌 碱性蛋白酶 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]