陈坤

作品数：8被引量：32H指数：4
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供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
发文主题：碱性蛋白酶枯草芽孢杆菌报告基因原核益生菌更多>>
发文领域：生物学轻工技术与工程理学农业科学更多>>
发文期刊：《现代生物医学进展》《遗传》《辽宁工程技术大学学报（自然科学版）》《现代化工》更多>>
所获基金：国家高技术研究发展计划天津市科技发展战略研究计划项目国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
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一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究被引量：4
《生物技术通报》2018年第1期208-214,共7页陈坤 袁飞燕 柴昊男 刘焕 王兴吉 张会图 路福平 
国家重点研发计划(2017YFB0308401)
碱性蛋白酶广泛的应用价值及市场供不应求的现状,旨在构建碱性蛋白酶高效表达系统。通过蛋白电泳和质谱检测的方法,由地衣芽孢杆菌中筛选获得一种新型启动子p Chi,以两种已知强组成型启动子p Shuttle-09和pyxi E为对照,研究其对克劳氏...
关键词：碱性蛋白酶 高效表达系统 启动子 异源表达 
嗜酸乳杆菌LB10.16及枯草芽孢杆菌BS7.29安全性评价被引量：8
《现代生物医学进展》2011年第1期22-25,共4页李军训 高洁 陈坤 张同存 杜连祥 
国家高技术研究发展计划项目资助(863计划)(2008AA10Z336)
目的:评价枯草芽孢杆菌BS7.29和嗜酸乳杆菌LB10.16的安全性,为其应用研究提供技术支持。方法:本文通过对小鼠灌服、急性攻毒、腹腔注射、小鼠最大耐受剂量、急性攻毒等试验方法进行枯草芽孢杆菌BS7.29和嗜酸乳杆菌LB10.16的安全性研究...
关键词：嗜酸乳杆菌 枯草芽孢杆菌 益生菌 安全性 
高活力碱性蛋白酶产生菌的选育与发酵放大被引量：7
《辽宁工程技术大学学报（自然科学版）》2009年第4期679-682,共4页孙同毅 殷向斌 郝继兴 陈坤 路福平 杜连祥 
国家高技术研究发展计划(863计划)基金资助项目(2007AA02Z212);国家科技资源平台基金项目资助(2005DKA21204-10)
为了选育高活力碱性蛋白酶产生菌株。采用复合诱变(紫外照射、NTG、离子注入)方法,结合平板初筛与摇瓶复筛。获得一株高产突变株HAPN-169,其酶活力为3.5×10u/mL。高产菌株HAPN-169根据气液接触中体积传氧系数kLa相同的原则发酵放大(7L,...
关键词：碱性蛋白酶 离子注入 发酵放大 发酵终点 
嗜碱芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶基因启动子的克隆及应用被引量：2
《遗传》2008年第11期1513-1520,共8页陈坤 黎明 成堃 杜连祥 张同存 路福平 
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(编号:2007AA02Z212)资助~~
利用TAIL-PCR方法从嗜碱芽孢杆菌PB92基因组中扩增出碱性蛋白酶基因上游启动子活性片段,测序分析后登录GenBank(EU130686)。此序列具有多个启动子特征区域,且在-538～-370 bp和-275～-128 bp两个区域存在反向读码框。对启动子片段进行...
关键词：嗜碱芽孢杆菌PB92 TAIL-PCR 碱性蛋白酶启动子 信号肽 
以β-半乳糖苷酶为报告基因的原核启动子检测体系构建被引量：2
《生物技术》2008年第1期13-16,共4页陈坤 黎明 樊欣迎 路福平 
天津市科技发展计划项目资助(06YFGPSH03500)
目的:以β-半乳糖苷酶为报告基因构建原核启动子检测体系。方法:以由质粒pDL扩增获得的bgaB基因为报告基因,将其克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pBE2,构建成一个具有启动子活性检测功能的重组质粒pBEB。将组成型启动子P43和诱导型启动...
关键词：Β-半乳糖苷酶 启动子活性检测 大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体 
以绿色荧光蛋白为报告基因的原核启动子检测体系构建被引量：4
《生物技术通报》2008年第2期184-187,共4页陈坤 黎明 高伟 路福平 
国家“863”计划资助项目(2007AA02Z212)
以质粒pMUTIN-GFP+扩增获得的gfp+基因为报告基因,将其克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pBE2,构建成一个具有启动子活性检测功能的重组质粒pBE2-GFP+。将组成型启动子P43和诱导型启动子Pspac克隆入pBE2-GFP+,得到重组表达载体pBE-GF...
关键词：绿色荧光蛋白(GFP+) 启动子活性检测 大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体 
高活力液体碱性蛋白酶制备工艺研究
《现代化工》2007年第11期31-33,共3页孙同毅 李军训 殷向彬 陈坤 路福平 杜连祥 
国家高技术研究发展计划("863"计划)(2007AA02Z212);国家科技资源平台项目(2005DKA21204-10);科技部中小企业创新基金(06C26211200692)
为了获得高质量浓缩液体蛋白酶,对提取工艺中不同絮凝剂,不同大小活性炭以及膜过滤条件进行了优化。结果表明0.1%质量分数NaAlO2絮凝剂在pH=8.0时絮凝速度快、效果好;1%中型颗粒活性炭脱色效果明显;聚丙烯膜超滤温度10℃、压力0.05 MPa...
关键词：液体蛋白酶 制备工艺 絮凝 超滤浓缩 
嗜碱性芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达被引量：5
《生物技术通报》2007年第5期120-123,127,共5页孙同毅 陈坤 郝继兴 路福平 杜连祥 
从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,Mapr分别插入到大肠杆菌载体pET-22b(+)和枯草芽孢杆菌载体pWB980中构建成重组分泌型表达载体pET22b(+)-Mapr、pWB980-Mapr。碱性蛋白酶基因分别在大肠杆菌宿主BL21和枯草芽...
关键词：嗜碱芽孢杆菌 碱性蛋白酶 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 
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