抗人RKIP单克隆抗体的制备及鉴定  

作　　者：韩海勃[1] 张志谦[1] 赵威[1] 

机构地区：[1]北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所北京肿瘤医院临床试验室,北京100036

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年第7期660-661,664,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30572160)

摘　　要：目的:制备抗人RKIP(hRKIP)的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:自行构建表达人RKIP重组蛋白(reRKIP),纯化的reRKIP免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用免疫荧光和Western blot鉴定mAb的特异性。结果:成功构建RKIP原核表达载体,转化BL21后可高效表达reRKIP,成功地获得4株(EC1,ED2,ED5和8B3)分泌抗人reRKIP mAb的杂交瘤细胞株,杂交瘤细胞培养上清分泌的mAb在免疫荧光和Westernblot试验中均可与细胞中RKIP蛋白反应。结论:成功地制备了4株抗hRKIP mAb,为进一步研究RKIP生物学功能奠定了基础。

关 键 词：RKIP 表达 单克隆抗体 

分 类 号：R392.33[医药卫生—免疫学]