前列腺特异膜抗原基因的克隆和真核表达  

作　　者：戴淑琴[1] 王军业[2] 曹开源[3] 徐霖[3] 袁广卿[3] 

机构地区：[1]中山大学肿瘤防治中心检验科,广东广州510060 [2]中山大学肿瘤防治中心胸科,广东广州510060 [3]中山大学中山医学院检验系,广东广州510060

出　　处：《中山大学学报（医学科学版）》2005年第B03期38-40,共3页Journal of Sun Yat-Sen University:Medical Sciences

基　　金：广东省自然科学基金(021907)

摘　　要：【目的】克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。【方法】用 RT-PCR 方法扩增前列腺癌组织标本中的 PSMA cDNA 序列,并将其克隆至真核表达载体 pcDNA3.0。用脂质体转染法,把 pcDNA3.0-PSMA 转染哺乳动物细胞,鉴定 PSMA 蛋白的表达。【结果】序列测定结果表明,两条引物之间的片段长度为2279bp,与预期长度一致。将克隆的编码区序列与 GenBank 的 PSMA 序列进行 Blast 对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100ku。【结论】成功扩增了 PSMA 编码区序列,构建了 PSMA 真核表达载体,建立了 PSMA 稳定表达的细胞株。经免疫分析,证实了真核细胞内表达的 PSMA 为分子质量正确的膜蛋白,且具有良好的抗原性。所获得的 PSMA 真核表达系统为进一步研究 PSMA 基因修饰的 DCs 疫苗对前列腺癌的治疗提供了物质基础。

关 键 词：前列腺特异膜抗原 克隆 分子 真核表达 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]