腺病毒载体携带凋亡素基因对人胃癌细胞的致凋亡作用  

作　　者：徐伟锋[1] 朱惠明[1] 宋洋[1] 王娜[1] 蔡筱彦[1] 王立生[1] 

机构地区：[1]暨南大学第二附属医院

出　　处：《广东医学》2008年第1期46-48,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：广东省深圳市科技计划一般项目资助(编号:深科信[2005]209号-18)

摘　　要：目的探讨带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的重组腺病毒载体介导的凋亡素(VP3)基因对人胃癌细胞的致凋亡作用。方法在HEK293细胞中包装Ad-EGFP-VP3和Ad-EGFP两种腺病毒,大量扩增,并测定两种腺病毒滴度。以MOI=20感染人胃癌细胞,12,24,48h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用Hoechst33258试剂盒染色,观察凋亡形态学改变。24h后用RT-PCR检测VP3基因的表达。6,12,24,48,72h后用FCM检测胃癌细胞的凋亡率。结果Ad-EGFP-VP3滴度为2.4×108pfu/ml,Ad-EGFP滴度为2.1×108pfu/ml。Hoechst33528染色显示Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞出现凋亡形态学改变。RT-PCR检测仅有Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞表达VP3基因的mRNA。FCM检测Ad-EGFP-VP3感染人胃癌细胞12h后凋亡率达51.7%。结论带有EGFP标记的重组腺病毒载体介导VP3基因导入胃癌细胞后,能有效诱导胃癌细胞凋亡。

关 键 词：凋亡素基因 腺病毒 胃癌细胞 

分 类 号：R737.250.5[医药卫生—肿瘤]