HSPgp96诱导巨噬细胞呼吸爆发与细胞内外游离钙关系的研究  

The relationship between macrophage respiratory burst induced by HSPgp96 and intracellular and extracellular free calcium

作　　者：周欣阳[1] 施海燕[2] 张天一[1] 顾君一[1] 

机构地区：[1]南通大学神经再生重点实验室,江苏南通226001 [2]南通大学基础医学院病理生理教研室,江苏南通226001

出　　处：《中国病理生理杂志》2008年第2期393-395,398,共4页Chinese Journal of Pathophysiology

摘　　要：目的:探讨从小鼠H22肝癌细胞中提纯的热休克蛋白gp96(HSPgp96)对小鼠腹腔巨噬细胞(PEMφ)呼吸爆发的影响及其与细胞内外游离钙的关系。方法:(1)用亲和层析和离子交换层析等方法从小鼠H22肝癌细胞中获得纯化的HSPgp96。(2)用细胞内过氧化物荧光探针H2DCF-DA监测HSPgp96作用于小鼠PEMφ过程中,单个细胞活性氧(ROS)信号的变化,反映PEMφ内呼吸爆发时的变化过程;用荧光探针Fluo-3/AM监测HSPgp96作用于小鼠PEMφ过程中,单个细胞内钙离子([Ca2+]i)信号的变化。(3)使用细胞膜和细胞内钙通道抑制剂及钙离子载体后,再观察HSPgp96作用后ROS信号的变化。结果:(1)加入HSPgp96后PEMφ内Fluo-3荧光强度立即上升,70s时增幅达161.05%±50.99%;当分别阻断细胞外钙内流、抑制细胞内钙库释放功能后110s增幅分别为84.81%±29.52%和46.21%±17.24%。同时阻断胞内外钙作用,HSPgp96这一诱发功能明显被抑制。加入钙离子载体后可见细胞内荧光强度迅速增强,于110 s时达156.98%±45.83%,随后迅速下降。(2)小鼠PEMφ受HSPgp96刺激后表征ROS的荧光强度立即上升,620 s达基础荧光值的636.78%±82.02%,随后始终维持在高水平。当分别阻断细胞外钙内流、抑制细胞内钙库释放功能后,再加入HSPgp96后细胞内ROS荧光值上升幅度较小。同时阻断了胞内外钙作用后,HSPgp96刺激后ROS荧光值上升没有明显高峰出现。结论:HSPgp96作用于小鼠PEMφ后,促进了细胞外钙内流并使细胞内钙库释钙,这是HSPgp96诱发细胞内活性氧增加的基本机制。

关 键 词：热休克蛋白糖蛋白96 活性氧 钙 巨噬细胞 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]