姬松茸ISSR特异扩增体系的研究  

Optimization of Inter-Simple Sequence Repeats (ISSR) Reaction System for Agaricus blazei

作　　者：林新坚[1] 江秀红[2] 蔡海松[1] 郑永标[1] 林陈强[1] 

机构地区：[1]福建省农业科学院土壤肥料研究所,福州350013 [2]福建省农产品质量安全检验检测中心,福州350003

出　　处：《食用菌学报》2007年第4期25-30,共6页Acta Edulis Fungi

基　　金：福建省科技厅项目"姬松茸低镉品种选育"(编号2002I010);福建省财政专项"福建省农业科学科技创新团队建设基金"(STIF-Y01)的部分研究内容

摘　　要：为了建立稳定的姬松茸(Agaricus blazei Murill)简单序列重复区间(Inter-Simple Sequence Repeats,ISSR)分子标记技术体系,笔者通过单因子试验分别研究了模板DNA、Mg2+浓度、dNTP、引物浓度和Taq酶用量对姬松茸ISSR-PCR扩增的影响,确定了姬松茸ISSR分析的最佳PCR条件为:25μL反应体系中,模板DNA20ng,引物0.75μmol/L,dNTP200μmol/L,Mg2+2.0mmol/L,Taq DNA polymerase 1.5U。并应用该优化体系筛选到6个适合姬松茸ISSR-PCR扩增的引物,为利用ISSR标记技术研究姬松茸的种质资源提供了参考。Single factor testing was used to determine the optimal concentrations of DNA template, primer, dNTP, Mg^2＋ and Taq DNA polymerase for PCR amplification of inter-simple sequence repeats （ISSR） in order to establish a stable ISSR-based molecular marker system for Agaricus blazei Murrill. The reaction mixture for optimum amplification contained： 20 ng DNA template, 0. 75 μmol/L primer, 200 μmol/L dNTP, 2.0 mmol/L Mg^2- and 1.5 U Taq DNA polymerase. Six primers suitable for PCR amplification of ISSR markers from A. blazei were selected using this system. Our data has important implications for A. blazei germplasm analysis.

关 键 词：姬松茸 简单序列重复区间 体系优化 单因子试验 

分 类 号：S646[农业科学—蔬菜学]