深圳地区人乳头瘤病毒18型E6E7基因的克隆、序列分析及E6/E7融合基因的构建  

作　　者：邓金桂 李体远[1] 

机构地区：[1]暨南大学第二临床医学院

出　　处：《广东医学》2008年第3期433-436,共4页Guangdong Medical Journal

基　　金：广东省深圳市卫生局重点课题(编号:200608)

摘　　要：目的克隆人乳头瘤病毒18型E6E7基因序列,构建E6/E7融合基因,为HPV治疗性疫苗的研制打下基础。方法采用PCR技术扩增1例HPV18阳性患者组织中HPV18 E6E7基因。将PCR产物回收,插入pSC-A质粒载体构建pSC-A/HPV18 E6E7重组质粒并进行核酸限制性内切酶鉴定及DNA测序分析;通过点突变方法使HPV18 E6、E7基因的开放读码框(ORF)融合以简化后续的基因表达问题。结果成功构建了pSC-A/HPV18 E6E7重组质粒,测序分析表明克隆的HPV18 E6E7基因与GenBank收录的德国株(AY262282)完全一致,点突变成功使E6基因的终止密码子突变,使HPV18 E6、E7基因融合。结论本研究获得了正确的HPV18 E6E7基因,为其重组表达及其相关研究奠定了良好基础。

关 键 词：人乳头瘤病毒18型 E6E7基因 基因克隆 点突变 序列分析 

分 类 号：R373.9[医药卫生—病原生物学] R737.33[医药卫生—基础医学]