微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测肿瘤标志物CA72-4的方法学研究  

作　　者：靳辉[1,2] 王栩 辛天兵[1,2] 高鹏[4] 林金明[3] 梁淑轩[1] 

机构地区：[1]河北大学化学与环境科学学院 [2]清华大学化学系,北京100084 [3]清华大学化学系 [4]北京科美东雅生物技术有限公司

出　　处：《科学通报》2008年第13期1538-1543,共6页Chinese Science Bulletin

基　　金：国家重点基础研究发展计划(批准号:2007CB714507);国家高技术研究发展计划(批准号:2006AA02Z4A8)资助项目

摘　　要：建立了一种高灵敏、高特异检测人血清中肿瘤标志物CA72-4的微孔板化学发光酶免疫分析法.采用双抗体夹心反应模式,以过氧化氢(H2O2)-鲁米诺(luminol)化学发光体系作为检测体系,以辣根过氧化物酶作为标记物,测定简便、快速.对几种物理化学参数,如温育条件、抗体包被条件、酶标记物稀释度和发光反应时间进行了考察和优化.结果显示方法的线性范围为0～200 U/mL,相关系数0.9995,检出限为0.18U/mL,批内、批间变异均小于10%.检测CA72-4的临床低值血清回收率为98.5%,高值血清回收率为101.3%,显示了良好的准确性.与人体血清中常见肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),CA24-2,CA19-9,CA15-3无明显交叉.为了验证该法用于构建临床诊断试剂盒的可行性,对所用试剂进行了37℃下的7d热稳定性考察,各技术指标与4℃放置7d无明显差异.对50例临床血样进行了测定,并与进口酶联诊断试剂盒测值呈良好相关(r2=0.9383).这些结果均表明该方法稳定、可靠、实用,可以满足商品化试剂盒的开发,在临床CA72-4检测及癌症辅助诊断中具有较高的应用价值.

关 键 词：化学发光酶免疫分析 肿瘤标志物 CA72-4 人血清 

分 类 号：R730.4[医药卫生—肿瘤]