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作 者:李金丽[1] 万艳平[1] 朱翠明[1] 王鑫[1] 尹卫国[1] 蔡恒玲[1]
机构地区:[1]南华大学病原生物学研究所
出 处:《中国肿瘤》2008年第10期883-886,共4页China Cancer
基 金:湖南省自然科学基金课题(06JJ4108);湖南省卫生厅资助课题(B2005084)
摘 要:[目的]研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与hDaxx的相互作用及对HepG2细胞凋亡的影响。[方法]构建pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBx酵母表达载体,利用酵母双杂交系统检测HBx与hDaxx的相互作用。将HBV X基因转染HepG2细胞,建立稳定表达HBx的HepG2X细胞株;pcDNA3.1-hDaxx转染HepG2X,5-Fu诱导凋亡,流式细胞术检测凋亡。[结果]共转pG-BKT7-hDaxx和pGADT7-HBx酵母质粒的酵母菌能在SD/-Trp-Leu-His(三缺)和SD/-Trp-Leu-His-Ade(四缺)的平板上生长,且Western blot检测到hDaxx和HBx在同一株酵母菌中的表达;稳定转染HBV X基因的HepG2细胞组凋亡率明显低于HepG2细胞组(P<0.01);且转染pcD-NA3.1-hDaxx后,细胞凋亡率进一步降低,与pcDNA3.1-hDaxx没有剂量依赖关系。[结论]HBx与hDaxx在酵母细胞内存在相互作用;hDaxx的即时高表达可增强HBx对5-Fu诱导的HepG2凋亡作用,HBx可能通过与hDaxx相互作用而抑制HepG2凋亡。
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