利用酵母双杂交研究与Ca^(2+)CRAC通道Orail相互作用蛋白  

Identification of Orail Interacting Proteins by Yeast Two-hybrid Screen

作　　者：夏孝强[1] 李芳华[1] 季一飞[1] 余守洋[1] 田军龙[1] 

机构地区：[1]四川大学华西医院神经分子生物学实验室,四川成都610041

出　　处：《华西医学》2008年第3期429-430,共2页West China Medical Journal

基　　金：四川大学CMB基金(编号:00-722)

摘　　要：目的:利用酵母双杂交等技术研究与CRAC通道蛋白Orail发生相互作用的蛋白质,从而揭示CRAC通道分子作用机制。方法:以Orail-C端为诱饵蛋白筛选大鼠海马和皮质cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白质,运用营养缺陷型培养,X-β-Gal蓝斑筛选等实验去除假阳性克隆,并通过GST-Pulldown体外实验验证其相互作用。结果:以Orai1-C端为诱饵最终筛出了几个阳性克隆,经测序分析,发现了其中一个感兴趣的蛋白。结论:Orail可以和该蛋白发生相互作用,其相互作用可能与CRAC通道功能调节有关。Objective：To investigate proteins interacting with CRAC channel protein Orail by using Yeast two hybrid.Methods：Yeast two hybrid was applied to screen rat cortex and hippocampus cDNA library,and Orail C domain as the bait.Using auxotroph culture and X-β-Gal assay to removal the false positive colony,and checking the interaction using experiment in vitro of GST-Pulldown.Results：we find a protein which can interact with Orail.Conlusion：Orail can interact with this protein.Their interaction may suggest a new molecular mechanism to regulate the function of CRAC channels.

关 键 词：CRAC通道 Orail 酵母双杂交 蛋白相互作用 

分 类 号：R346[医药卫生—基础医学]