基于CA杂合启动子基因敲入载体的构建  

Construction of Based CA Hybrid Promoter Konckin System

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作  者:崔义元[1] 陈米娜[1] 王德华[1] 李芳华[1] 

机构地区:[1]四川大学华西医院神经分子生物学实验室,四川成都610041

出  处:《华西医学》2008年第3期431-433,共3页West China Medical Journal

基  金:四川大学CMB基金(编号:00-722)

摘  要:目的:改造原有的Rosa26基因敲入系统,引入启动能力更强的CA杂合启动子(由鸡actin启动子和SV40增强子融合而成)。方法:运用PCR,限制性内切酶酶切及T4连接酶连接的方法,构建带有CA启动子的基因敲入载体。结果:成功地对原有Rosa26基因敲入系统进行了改造,引入了CA启动子,并且成功构建了mGluR5基因敲入载体。结论:基于CA杂合启动子的基因敲入载体具有更强的启动能力,而且能够在某些特定组织中增强目的基因的表达,为今后研究基因功能及疾病模型小鼠的制备奠定了良好基础。Objective:To modify the original Rosa26 knockin system and introduce the enhanced CA promoter(chicken actin promoter fused with SV40 enhancer).Methods:To make knockin-construct based CA promoter with PCR,restriction enzymes and T4 ligase.Results:Succeeded in modifying the original Rosa26 knockin system,introduced CA hybrid promoter and established mGluR5 knockin construct.Conclusion:Knockin system with the enhanced CA promoter displayed better promotability,also,in certain tissues(brain etc),gene expression is empowered,laid solid foundation for researching gene functions and constructing mouse disease models.

关 键 词:Rosa26基因敲入系统 CA杂合启动子 MGLUR5 

分 类 号:Q78[生物学—分子生物学]

 

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