鸡贫血病毒Taq Man探针荧光定量PCR检测方法的建立  

Development of Taq Man fluorescence quantitative PCR assay for detection of chicken anemia virus

作　　者：宋修庆[1] 高宏雷[1] 王晓艳[2] 林欢[1] 宇文延青[1] 王永强[1] 王笑梅[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]中国科学院生物物理研究所,北京100101

出　　处：《中国预防兽医学报》2009年第1期56-59,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

摘　　要：根据鸡贫血病毒(CAV)的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该检测方法的敏感性达到10个病毒拷贝/μL,与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复试验相关系数都小于5%。实验数据证明该检测方法敏感性高,特异性好,重复性佳。A fluorescence quantitative PCR assay was developed using primers and probes designed according to a high conservative sequence of chicken anemia virus. A series of duplex fluorescent quantitative PCRs were carried out to produce the standard curves. The results showed that the fluorescence quantitative PCR assay could detect 10 copies/μL of plasmid DNA with high reproducibility （C.V of the intra or inter） assay was below 5 %. No cross-reaction was detected with other avian virus.

关 键 词：鸡贫血病毒 TAQ Man探针 荧光定量PCR 

分 类 号：S852.659.1[农业科学—基础兽医学]