SOE-PCR法检测PRRSV ORF5缺失跨膜区的融合蛋白基因片段的研究  

作　　者：刘明莉[1] 夏平安[1] 党占国[1] 王中明[1] 邱璜[1] 卢高峰[1] 李伟娟[1] 

机构地区：[1]河南农业大学牧医工程学院

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2009年第3期80-82,共3页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

摘　　要：PRRSV为有囊膜的单股正链RNA病毒，含有8个开放阅读框（open reading frames，ORFs），其中ORF5—7分别编码PRRSV主要的结构蛋白：糖基化囊膜蛋白（E）、膜蛋白（M）和核衣壳蛋白（N）。糖基化囊膜蛋白（E）又称GP5蛋白，具有良好的抗原性和免疫原性，分子质量约为25ku。重叠延伸PCR技术简称SOE—PCR，又称重叠区扩增基因拼接法、交错延伸剪接PCR技术或套叠PCR技术。此技术利用PCR技术在体外进行有效的基因重组和定点突变，而且不需要内切酶消化和连接酶处理。研究在分析了GP5蛋白跨膜区之后，采用SOE—PCR的方法将跨膜区基因缺失，对GP5蛋白编码跨膜区外的基因片段进行了克隆，旨在为获得高表达、高活性的基因产物打下基础。

关 键 词：PCR法 基因片段 跨膜区 融合蛋白 重叠区扩增基因拼接法 PCR技术 GP5蛋白 正链RNA病毒 

分 类 号：S852.659.6[农业科学—基础兽医学] Q785[农业科学—兽医学]