重叠区扩增基因拼接法

作品数:18被引量:62H指数:4
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相关机构:石河子大学中国科学院浙江大学杭州师范大学更多>>
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应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体被引量:1
《天津医药》2013年第12期1208-1210,共3页陆玉成 车峰远 苏全平 尤翠平 王龙 王富敏 于继徐 
山东省自然科学基金资助项目(项目编号:ZR2010HM041);山东省博士后创新项目专项资金(项目编号:201102004)
目的构建铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing)分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因,然后将2段基因拼接起来,得到SOD1-G93A基因,并克隆至pcDNA3....
关键词:超氧化物歧化酶 点突变 质粒 DNA 重组 肌萎缩侧索硬化 重叠区扩增基因拼接法 
ABCA1胞外第四环缺失突变体的构建及其抗砷性初步研究被引量:2
《中国生物工程杂志》2010年第3期27-32,共6页程建兵 谭晓华 罗燕 杨磊 
国家自然科学基金(30860241)
目的:构建ABCA1细胞外第四环第1479~1597位氨基酸残基缺失的突变体。方法:采用重叠区扩增基因拼接法构建ABCA1第1479~1597位氨基酸残基缺失的突变体基因,并将其克隆至pcDNA3.1/V5-His/ABCA1重组载体上,脂质体法转染Hela细胞,激光共聚...
关键词:ABCA1 突变体 重叠区扩增基因拼接法 
β-甘露聚糖酶基因高效表达体系的构建被引量:2
《湖北农业科学》2009年第8期1807-1810,共4页李斌 刘正初 王溪森 石岩 
国家"863"计划项目(2006AA02Z249)
为构建β-甘露聚糖酶基因高效表达体系,采用重叠区扩增基因拼接法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CTC S-层蛋白启动子和欧文氏杆菌(Erwinia carotovora)CXJZ95-198 β-甘露聚糖酶基因完整开放阅读框定向连接,得到基因拼接体sl...
关键词:Β-甘露聚糖酶基因 欧文氏杆菌 重叠区扩增基因拼接法 
SOE-PCR法检测PRRSV ORF5缺失跨膜区的融合蛋白基因片段的研究
《黑龙江畜牧兽医》2009年第3期80-82,共3页刘明莉 夏平安 党占国 王中明 邱璜 卢高峰 李伟娟 
PRRSV为有囊膜的单股正链RNA病毒,含有8个开放阅读框(open reading frames,ORFs),其中ORF5—7分别编码PRRSV主要的结构蛋白:糖基化囊膜蛋白(E)、膜蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)。糖基化囊膜蛋白(E)又称GP5蛋白,具有良好的抗...
关键词:PCR法 基因片段 跨膜区 融合蛋白 重叠区扩增基因拼接法 PCR技术 GP5蛋白 正链RNA病毒 
C型乙型肝炎病毒基因SOEing法引入228位点突变
《中国医科大学学报》2008年第6期736-738,共3页徐晓雪 房凯 钟连生 潘忠诚 吴土焕 赵雨杰 
辽宁省教育厅高校科学研究计划项目(202011001)
目的为获取乙型肝炎病毒(HBV)基因分型芯片病毒靶序列,对C型HBV第228位碱基进行点突变。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对分析,显示基因型A,C,D,G在228位上的碱基为G,而基因型B,E,F,H为A,所以检测该位点的碱基类型可以实现HBV...
关键词:乙型肝炎病毒 基因分型 重叠区扩增基因拼接法 
乙型肝炎病毒基因生物信息学分析及特异片段的制备被引量:2
《中国医科大学学报》2008年第5期583-585,共3页徐晓雪 房凯 钟连声 潘忠诚 李超 胥威 赵雨杰 
辽宁省教育厅高校科研基金资助项目(202011001)
目的制备HBV基因分型芯片模板。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对,选取6个碱基位点作为分型位点,应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing法)对C型HBV片段进行点突变。结果在所选位点上成功引入点突变。结论SOEing法是一种简便引入点...
关键词:重叠区扩增基因拼接法 乙型肝炎病毒 基因分型 
HBV X-HCV C融合基因重组腺病毒的构建及鉴定与表达
《内蒙古医学杂志》2007年第9期1043-1047,共5页马臻 陈国民 
目的:应用重叠区扩增基因拼接法(gene SOEing)获得HBV X-HCV C融合基因,构建HBV X-HCV C融合基因重组腺病毒。方法:应用gene SOEing法扩增HBV X-HCV C融合基因并将其克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,获得重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-XC,...
关键词:HBV X基因 HCV C基因 融合基因 重叠区扩增基因拼接法 腺病毒 
SOEing法构建EGFP真核表达载体及其在杜氏盐藻中的表达被引量:1
《水生生物学报》2007年第4期546-551,共6页李杰 闫红霞 曲东京 刘红涛 鲁照明 薛乐勋 
国家自然科学基金资助项目(30270031)资助
通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,SOEing)构建含有杜氏盐藻(Dunaliella salina)硝酸盐还原酶(NR)基因5′-上游序列(Pnr)and 3′-端序列(Tnr)的EGFP真核表达载体,并将其转化杜氏盐藻。利用改进的SOEing法,...
关键词:杜氏盐藻 重叠区扩增基因拼接法(SOEing) 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 真核表达载体 
抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达被引量:20
《南京农业大学学报》2007年第3期120-123,共4页王秀青 张素芳 曹瑞兵 周斌 陈溥言 
江苏省科技攻关项目(BE2006364);教育部高等学校博士点基金(20050307023)
通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点。亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用SacⅠ酶切使之线性化,采用电...
关键词:天蚕素B 抗菌肽 毕赤酵母 表达 抑菌活性 重叠区扩增基因拼接法(SOE) 
一种新融合抗菌肽Hex-Mag基因的克隆、表达及其抗菌活性的研究被引量:12
《微生物学报》2007年第1期115-120,共6页李桂平 陈仪本 
广东省科技攻关项目(2003C104022)~~
通过在Magainin1-12(GIGKFLHSAKKF)的N端添加碱性氨基酸片段Hexapeptide(RRWQWR)以增强其对细胞膜的吸附能力来提高Magainin1-12的抗菌活性。利用Hexapeptide和Magainin1-12的基因序列,结合酵母偏爱密码子设计出新的融合基因Hex-Mag,通...
关键词:Hexapeptide(RRWQWR) Magainin1-12 重叠区扩增基因拼接法 融合肽Hex-Mag 
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