应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体  

作　　者：陆玉成[1] 车峰远[1,2] 苏全平[1] 尤翠平[1] 王龙[1] 王富敏[1] 于继徐[1,2] 

机构地区：[1]山东省临沂市人民医院神经病学实验室,276000 [2]山东省临沂市人民医院神经内科

出　　处：《天津医药》2013年第12期1208-1210,共3页Tianjin Medical Journal

基　　金：山东省自然科学基金资助项目(项目编号:ZR2010HM041);山东省博士后创新项目专项资金(项目编号:201102004)

摘　　要：目的构建铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing)分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因,然后将2段基因拼接起来,得到SOD1-G93A基因,并克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因,测序结果与GenBank完全一致;对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)进行双酶切鉴定,测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)真核表达载体。

关 键 词：超氧化物歧化酶 点突变 质粒 DNA 重组 肌萎缩侧索硬化 重叠区扩增基因拼接法 

分 类 号：R512.62[医药卫生—内科学]