GM-CSF PCR产物的克隆:一种快速克隆PCR产物方法的建立  

作　　者：郭仁锋 薛静 程云 罗清华 

机构地区：[1]北京传染病研究所免疫研究室,北京100039

出　　处：《生物技术通讯》1998年第3期234-235,共2页Letters in Biotechnology

摘　　要：由于Taq DNA聚合酶对腺苷A的优先聚合,PCR产物两单链3′端带有一非模板依赖的碱基,所加多余碱基几乎总是A,因此用克隆平端DNA片段的方法克隆这种PCR产物,很难得到阳性重组子。解决上述问题的方法有3种,一是利用T₄ DNA聚合酶的3′外切酶活性,将PCR产物的多余碱基切掉;二是利用3′端带有dT的T-载体进行克隆;另外还可以用Pfu等DNA聚合酶扩增出不带多余碱基的PCR产物,尔后进行平端克隆。我们利用T-载体克隆的原理,酶切、

关 键 词：PCR产物 DNA聚合酶 GM—CSF 重组质粒 限制性内切酶 传染病 重组子 DNA片段 菌落PCR PCR技术 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学]