重组人载脂蛋白E3在毕赤酵母中的分泌表达及鉴定  

作　　者：苏曼曼[1] 陈月[1] 王文佳[1] 许天敏[2] 常伟勤[2] 颜炜群[1] 包晓群[3] 

机构地区：[1]吉林大学药学院,吉林长春130021 [2]吉林大学第二医院 [3]吉林大学中日联谊医院

出　　处：《中国老年学杂志》2009年第7期841-843,共3页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的在毕赤酵母中高效表达重组人载脂蛋白E3(rhApoE3),制备与天然hApoE3具有相同结构和活性的rhApoE3。方法用RT-PCR法自人肝组织RNA克隆hApoE3的cDNA,构建真核分泌型表达载体pPICZα/hApoE3。经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X33。甲醇诱导后进行SDS-PAGE、Western印迹分析,筛选高表达工程菌。结果经PCR法克隆的hApoE3DNA序列与GenBank登录的序列一致。SDS-PAGE和Western印迹分析均在分子量约34kD出现特异性条带,rhApoE3表达量达150mg/L。结论在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生rhApoE3,获得高效表达rhApoE3的毕赤酵母工程菌。

关 键 词：重组人载脂蛋白E3 分泌表达 毕赤酵母 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]