马传染性贫血病毒gp90蛋白的表达及其在诊断中的潜在应用  

Successful Expression of EIAV gp90 and Potential Application for Diagnosis of EIAV Infection

作　　者：陈新江[1,2] 毛洁[1,2] 孟庆来[3] 张晓燕[3] 张耀洲[1,2] 

机构地区：[1]浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所,杭州310018 [2]浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018 [3]中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防与控制中心病毒与免疫研究室,北京100050

出　　处：《科技通报》2009年第3期300-304,共5页Bulletin of Science and Technology

基　　金：国家自然科学基金(30671941);浙江省科技厅一般项目(2005C300542);"863"项目(2007AA021703)

摘　　要：以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90为模板,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Western blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,测定的效价为1∶13,000。EIAV gp90 was amplified from the pVRCSV1.0-syn-gp90 by PCR. The amplified product was cloned into expression vector pET-28a （＋）and over-expressed in E.coli Rosetta. ELISA and Western blotting analysis indicated that the recombinant protein could react with the EIAV Standard positive serum. Purified gp90 used as the immunogen to raise polyclonal antibody,which had a titer of 1：13,000.

关 键 词：GP90基因 原核表达 纯化 EIAV 诊断 

分 类 号：S851.34[农业科学—预防兽医学]