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作 者:郑学瑞[1,2] 王兴华[2] 李寅[1] 张延平[1]
机构地区:[1]中国科学院微生物研究所,北京100101 [2]山西大学生命科学与技术学院,山西太原030006
出 处:《山西大学学报(自然科学版)》2009年第A01期132-136,共5页Journal of Shanxi University(Natural Science Edition)
基 金:基金项目:国家高技术研究计划(863计划);国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘 要:二醇脱水酶是Klebsiella oxytoca厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的限速酶,该酶需要在辅酶B12的辅助下才具有催化活性,但是很容易失活,限制了1,3-丙二醇的生物合成.文章从Clostridium butyricum DSM 10702基因组中扩增到含甘油脱水酶(一种二醇脱水酶的同工酶,但不依赖于辅酶B12)基因的1,3-PD操纵子,利用表达载体pITK将之转入1,3-丙二醇生产菌K.oxytoca DA-1HB中,获得了重组菌K.oxytoca PK,并研究了其生长代谢性能.结果表明,重组质粒稳定性良好,厌氧摇瓶培养时重组菌的1,3-丙二醇产量提高52.7%.Glycerol can be reducted to 1,3-propanediol (1,3-PD) in Klebsiella oxytoca by catalyzing of coenzyme B12-dependent diol dehydratase and 1,3 PD dehydrogenase, where the diol dehydratase is crucial for biosynthesis of 1,3-PD due to its easier inactivation characteristics. To improve the metabolic flux of glycerol to 1,3-PD,here the coenzyme B12-independent glycerol dehydratase from Clostridium butyricm DSM 10 702 would be introducted into Klebsiella oxytoca through an expressing vector. Comparing with that of the parent strain K. oxytoca DA-1HB, 1,3-PD final concentration of recombinant strain K. oxytoca PK was increased by 52.7%.
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