人B7逆转录病毒基因转移体系的建立及在肾癌细胞中的表达  

Construction of retroviral delivery system mediating human B7 gene and B7 expression in renal cell carcinoma cells

作　　者：邢念增[1,2,3] 张智清[1,2,3] 郭应禄[1,2,3] 俞莉章[1,2,3] 刘漓波[1,2,3] 陈庆华[1,2,3] 朱丽华 钭理强[1,2,3] 

机构地区：[1]北京医科大学第一医院泌尿外科 [2]中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 [3]北京医科大学第一医院检验科

出　　处：《中华泌尿外科杂志》1998年第7期418-421,共4页Chinese Journal of Urology

摘　　要：将人Ｂ７基因亚克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ中，构建了人Ｂ７逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮＢ７，经Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导转染包装细胞，并通过Ｇ４１８筛选获得较高病毒滴度的细胞株ＰＡ３１７／ｐＬＸＳＮＢ７（３×１０５～１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）。用此逆转录病毒基因转移体系将Ｂ７基因转移到肾癌ＧＲＣ１细胞中，经ＲＴＰＣＲ、间接免疫荧光及ＬＳＡＢ细胞免疫组化等检测方法检测到转基因细胞中Ｂ７ｍＲＮＡ及Ｂ７分子的表达。介导人Ｂ７基因的逆转录病毒基因转移体系的建立，为人肾癌转基因瘤苗的应用研究提供了实验基础。The expressing plasmid pLXSNB7 was constructed by subcloning human B7 gene into the retroviral vector pLXSN, pLXSNB7 was then transfected into package cell line PA317 using Lipofectin and finally PA317/pLXSNB7 cell strains were obtained yielding 3×105～1×106 cfu/ml virus titer after G418 selection. B7 mRNA of the transfected tumor cells was detected by RTPCR. Indirect immunofluorescent microscopy and immunohistochemistry showed the expression of B7 on the surface of the infected tumor cells. The experiment laid the foundation to develop B7 genegransduced tumor vaccine of renal cell carcinoma.

关 键 词：逆转录病毒载体 肾肿瘤 瘤苗 

分 类 号：R737.110.1[医药卫生—肿瘤]