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作 者:刘云建[1] 田东[2] 刘皎[3] 徐桂珍[1] 纪栋栋[1] 汪谦[4]
机构地区:[1]山东滨州医学院附属医院肝胆外科,256603 [2]滨州医学院附属医院病理科 [3]滨州医学院解剖学教研室 [4]中山大学附属第一医院肝胆外科
出 处:《中华实验外科杂志》2009年第10期1325-1326,共2页Chinese Journal of Experimental Surgery
基 金:广州市科委资助项目(200422-E0131)
摘 要:目的观察信号通路Sonic hedgehog(Shh)抑制因子Rab23的RNA干扰对人肝癌细胞株Huh7增殖和凋亡的影响。方法实验细胞分为转染组、隐性对照组和空白对照组。设计针对Rab23基因的siRNA,通过Liperfectemin2000将其转染进Huh7细胞株,噻唑蓝(MTT)比色法试验检测沉默Rab23基因后第0、8、16、24和48h的细胞数和MIT的D(λ)值;流式细胞术检测沉默Rab23基因48h细胞凋亡情况。结果转染组与空白对照组比较,加入siRNA后,8h时细胞增殖数无明显减少,16、24和48h时细胞数明显减少(P〈0.01),24、48h时细胞存活率差异有统计学意义。隐性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05);Huh7细胞经siRNA作用48h后,可见亚二倍体核型峰-凋亡峰。其中,转染组凋亡率为28%,隐性对照组及空白对照组未见凋亡峰。结论Rab23对肝细胞癌的增殖起维持作用;通过沉默该基因可以抑制肝癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。Objective To investigate the effect and mechanism of RNA interference targeting Rab23 on proliferation and apoptosis of hepatocellular carcinoma (HCC) cell line Huh7, and provide a new pathway for gene therapy of HCC and its recurrence and metastasis. Methods The Huh7 cells were cultured in vitro, and the MTr assay was used to examine the antiproliferative effect of siRNA. Flow cytometry (FCM) was used to examine the effects of Rab23 silencing on apoptosis of Huh7 cells. Results Compared with the negative and blank control groups, the transfection group showed a marked decrease of proliferation at 16,24 and 48 h,and apoptosis rate of Huh7 cells was about 28% at 48 h after Rab23 was silenced by siRNA. Conclusion Rab23 is essential for the maintaining of HCC cell proliferation. Silencing Rab23 can inhibit the growth of HCC cells and induce apoptosis.
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