康氏木霉纤维素酶转录因子ACEII与外切纤维二糖水解酶基因I(cbh1)启动子的结合分析  

Analysis of Cellulase Regulator ACEII Interaction with cbh1 Promoter Fragment in Trichoderma koningii

作　　者：凌敏[1,2] 梁纲[2] 覃拥灵[1] 李楠[1] 梁智群[1] 

机构地区：[1]广西大学生命科学与技术学院,南宁530004 [2]广西医科大学生物化学与分子生物学教研室,南宁530021

出　　处：《中国生物工程杂志》2009年第10期60-63,共4页China Biotechnology

基　　金：国家自然科学基金(20066001);广西亚热带生物资源保护和利用重点实验室开放课题(SB0709)资助项目

摘　　要：ACEI、ACEII和Xyr1是康氏木霉中调控纤维素酶基因表达的转录因子。体外实验已证实ACEI和Xyr1可与cbh1启动子上的287bp序列(-304bp^-18bp)结合从而调控cbh1基因转录,但ACEII是否可与此序列结合仍未清楚。为进一步研究ACEII调控纤维素酶基因表达的机制,利用PCR技术扩增康氏木霉ACEII DNA结合区的基因序列,并使其在大肠杆菌中表达。凝胶迁移率移动试验表明ACEII DNA结合区不能与cbh1启动子的287bp序列结合。提示了康氏木霉cbh1基因在诱导表达时起调控作用的主要是Xyr1,而不是ACEII。这对阐明真菌纤维素酶基因表达调控的分子机制具有重要的意义。ACEI,ACEII and Xyr1 are transcriptional factors that regulate cellulase gene expression in Trichoderma koningii.In vitro experiments have shown that ACEI and Xyr1 bind to the cbh1 promoter fragment（-304 to-18） and regulate the gene transcription.However,whether ACEII binds to this 287bp fragment is still unclear.To further elucidate the regulatory mechanism of ACEII for cellulase,DNA-binding domains of ACEII from T.Koningii were expressed in E.coli.It could not show binding to the cbh1 promoter fragment（-304 to-18） by electrophoresis mobility shift assays,suggesting that it is Xyr1 but not ACEII binds playing an essential role during induction of cbh1 gene transcription.

关 键 词：ACEII 纤维素酶 外切纤维二糖水解酶基因I 凝胶迁移率移动试验 康氏木霉 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]