应用发酵罐高密度生产日本血吸虫重组蛋白Sj28GST工艺的研究  

STUDIES ON THE FERMENTATION PROCESS OF SJ28GST IN THE RECOMBINANT E.COLI TB1 WITH FERMENTOR

作　　者：沈阳[1] 林矫矫[1] 姚利晓[1] 刘金明[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院上海兽医研究所上海动物生物技术研究中心农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200232

出　　处：《中国动物传染病学报》2009年第4期52-56,共5页Chinese Journal of Animal Infectious Diseases

基　　金：国家863计划(2006AA10A207-1);国家支撑计划(2006BAD06A09)

摘　　要：为了大量表达日本血吸虫重组蛋白Sj28GST,本文采用葡萄糖作为碳源,在不同的培养温度、种子液接种量I、PTG浓度I、PTG诱导时间等培养条件下进行高密度发酵表达日本血吸虫重组蛋白Sj28GST,分别用Bradford法和比浊法分析重组蛋白Sj28GST的浓度和重组大肠杆菌的密度。优化应用发酵罐高密度发酵表达日本血吸虫重组蛋白Sj28GST的培养温度、种子液接种量I、PTG浓度I、PTG诱导时机等培养条件。研究结果表明,在培养温度37℃、种子液接种量7%、溶解氧浓度保持20%以上、pH7.2左右、用0.7mmol/L IPTG在重组大肠杆菌TB1开始培养后5h进行诱导,细菌密度明显提高,获得的重组蛋白Sj28GST的表达产量最高,为74.32mg/L发酵液,菌体密度达到13OD左右。The optimal conditions were studied for large scale production of Schistosoma japonicum 28 kDa glutathione S-transferase（Sj28GST） by fermenting recombinant E.coli TB1 in a bioreactor containing the MBL medium（glucose 5 g/L,tryptone 20 g/L,yeast extract 10 g/L KH2PO4 3.5 g/L,K2HPO4 5 g/L,（NH4）2HPO4 3.5 g/L,NaCl 5 g/L and MgSO4·7H2O 1 g/L）.These conditions included incubation temperature,pH,inoculation volume,dissolved oxygen concentration,IPTG concentration and start time of IPTG induction.The highest yields of bacterial density（13 OD） and protein concentration（74.32 mg/L） were obtained at incubation temperature of 37 ℃,pH 7.2,dissolved oxygen concentration 20%,0.7 mmol IPTG and start of induction at 5 h post inoculation.

关 键 词：高密度发酵 Sj28GST 重组大肠杆菌TB1 

分 类 号：S852.735[农业科学—基础兽医学]