HBV adr亚型体外感染肝细胞模型的建立  

Establishment of hepatocyte model infected with HBV adr subtype

作　　者：冷向锋[1] 张秋[2] 

机构地区：[1]青岛大学医学院附属医院,山东青岛266003 [2]山东大学药学院,山东济南250012

出　　处：《中国病理生理杂志》2010年第1期200-202,共3页Chinese Journal of Pathophysiology

基　　金：山东大学基金资助项目(No.10000066960145)

摘　　要：目的:构建1.1倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体,稳定转染L-02细胞,建立HBVadr亚型体外感染的细胞模型。方法:以pVUⅡ酶切质粒p3.6Ⅱ获得1.1倍HBV DNA片段,用牛小肠碱性磷酸酶将经EcoRV线性化的pcDNA3去磷酸化,以T4DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3,将构建的pcDNA3-1.1HBV以脂质体转染L-02肝癌细胞,经G418稳定筛选。ELISA检测转染细胞培养上清中HB-sAg、HBeAg的表达。RT-PCR检测转染细胞中HBpreS2、HBX的表达。结果:成功构建了1.1倍HBV全基因真核表达载体,稳定转染L-02后,建立了新的肝细胞系L-02.1Z,其培养上清中可检测到HBsAg、HBeAg的稳定表达,并可检测到HBpreS2、HBX RNA在转染细胞中表达。结论:该表达载体可介导病毒复制,其稳定转染的细胞可作为一种新型的HBV体外感染模型。

关 键 词：肝炎病毒 乙型 表达载体 真核细胞 

分 类 号：R373.21[医药卫生—病原生物学]