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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
机构地区:[1]福建省妇儿医院,福建省妇幼保健院,福建福州350001 [2]福建医科大学附属第一医院,福建福州350001
出 处:《中国肿瘤》2010年第1期59-62,共4页China Cancer
基 金:福建省教育厅科研基金资助项目(JB06249);福建医科大学教授学术发展基金资助项目(JS06042)
摘 要:[目的]构建S期激酶相关蛋白2(Skp2)特异性RNA干扰慢病毒表达载体,观察其对子宫内膜癌HEC-1-A细胞中Skp2表达的影响,研究Skp2基因沉默对HEC-1-A细胞生长的抑制作用。[方法]构建针对Skp2基因的慢病毒LV-shRNA载体,转染HEC-1-A细胞,倒置荧光显微镜观察GFP的转染效率,半定量RT-PCR和Western blotting检测各组细胞Skp2基因表达,细胞计数分析Skp2RNA干扰对HEC-1-A细胞增殖的影响。[结果]重组病毒质粒经PCR和测序证实准确连接。转染慢病毒载体的HEC-1-A细胞较之转染阴性对照载体的细胞,其Skp2的表达在mRNA和蛋白水平均明显下降,而且细胞增殖明显受到抑制。[结论]利用RNA干扰技术,可有效下调Skp2基因的表达,并在体外抑制子宫内膜癌HEC-1-A细胞的生长。Skp2有望成为子宫内膜癌辅助基因治疗的潜在靶点。
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