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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:游猛[1] 潘志明[1] 耿士忠[1] 马全刚[1] 方强[1] 焦新安[1]
机构地区:[1]扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏扬州225009
出 处:《动物医学进展》2010年第2期20-25,共6页Progress In Veterinary Medicine
基 金:国家自然科学基金资助项目(30871860);高等学校科技创新工程重大项目(706032);江苏省自然科学基金项目(BK2007511;BK2008011);江苏省高校自然科学基础研究项目(07KJB230136);江苏省高校"青蓝工程"项目
摘 要:应用PCR技术分别扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC基因以及含有新城疫病毒F蛋白部分表位的基因片段,通过柔性肽(Gly4Ser)2编码序列将二者串联并克隆到质粒pET30a+上,获得重组原核表达质粒pET-fliC-F,将其转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。Western blot证实重组菌表达的fliC-F融合蛋白能与小鼠抗fliC和抗F蛋白两种多抗血清发生特异性反应。动物试验显示,fliC-F融合蛋白能够刺激C3H/HeJ小鼠产生针对F蛋白的特异性血清抗体,说明原核表达系统表达的fliC-F融合蛋白具有较好的免疫原性。The fliC gene of Salmonella typhimurium, and the partial fragment of fusion protein (F) gene of Newcastle disease virus were amplified using PCR and ligated with a DNA sequence encoding a fh:xibte peptide (Gly4 Ser)2. The fusion gene was inserted into plasmid pET30a+ to construct the recombinant prokaryotic expression plasmid pET-fliC-F. Then the recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21(DE3) and induced to express the desired fliC-F protein. Western blot analysis showed that the fliC -F protein could react with murinal antiserum against fliC or F protein,respectively. It indicated that the fusion protein could significantly elicit specific immune response in immunized C3H/HeJ mice. These results demonstrated that the fliC F fusion protein expressed by E. coli had good immunogenicity.
关 键 词:鼠伤寒沙门菌 鞭毛蛋白 新城疫病毒 融合蛋白 免疫原性
分 类 号:S852.659.5[农业科学—基础兽医学] S852.612[农业科学—兽医学]
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