鼻咽癌细胞株侧群细胞染色条件的优化及其表面标记物的测定  

作　　者：焦锋[1] 邱际华[1] 张千兵[1] 姚开泰[1] 刘求真[1] 

机构地区：[1]南方医科大学肿瘤研究所,广州510515

出　　处：《第三军医大学学报》2010年第5期499-501,共3页Journal of Third Military Medical University

基　　金：广东省科技计划项目(2007B031515006)

摘　　要：目的探讨鼻咽癌细胞株侧群细胞所需荧光染料Hoechst33342最佳的孵育时间和浓度;研究细胞密度对侧群细胞比例的影响;测定其表面标记物CD133和ABCG2蛋白的表达。方法荧光染料Hoechst33342孵育细胞,选择不同的时间(30、60、90、120、150、180min)及不同的浓度(3、4、5、6、7、8mg/L),用流式细胞仪检测,倒置荧光显微镜观察选择合适的孵育时间和浓度。选取不同生长密度(70%、100%)的细胞,流式细胞仪检测侧群细胞比例的变化。荧光抗体CD133和ABCG2共孵育Hoechst33342,流式细胞仪测定细胞表面标记物CD133和ABCG2蛋白的表达。结果Hoechst33342孵育时间为70min,侧群细胞染色效果较佳。不同的鼻咽癌细胞株,合适孵育终浓度不同,如CNE2为6mg/L,而CNE1为2mg/L。另外,侧群细胞的比例呈生长密度依赖性。CD133蛋白总含量恒定在0.1%～0.2%,侧群细胞和主群细胞表达量没有显著差异,CD133并不富集于侧群细胞中。而侧群细胞ABCG2蛋白较主群细胞优势表达,比例达80%以上。结论鼻咽癌细胞株侧群细胞最佳的荧光染料染色时间为70min,不同细胞株孵育终浓度不同。侧群细胞的比例呈密度依赖,与ABCG2密切相关。

关 键 词：侧群细胞 主群细胞 肿瘤干细胞 流式细胞术 HOECHST33342 鼻咽肿瘤 

分 类 号：R730.43[医药卫生—肿瘤] R739.63[医药卫生—临床医学]